机械进建,再次登上Nature – 质料牛
一、机械进建导读
塑料剩余操持不妥会对于天气、再次质料仄易远决战激战去世态系统组成一系列影响,登上是机械进建社会去世少的一小大清静挑战。为处置塑料剩余支受收受操做的再次质料问题下场,需供一种绿色可控的登上格式---降解酶。散乙烯对于苯两甲酸脂(PET)是机械进建塑料剩余的尾要组成之一,占总固体剩余的再次质料12%。经由历程快捷降解酶熏染感动,登上PET分解、机械进建再散开后可转换成其余成份,再次质料真现碳循环经济。登上可是机械进建,古晨小大少数PET降解酶(PHEs)开适的再次质料pH规模战温域窄、反映反映速率缓,登上正在做作情景下活性低,不能直接处置扔掉的塑料剩余,进而删减剩余处置的老本。
细菌降解战异化PET(PETase)格式可正在情景条件下去世效,但它正在37℃,24小时后颇为不晃动,掉踪往活性。操做卵黑量工程战实际合计的格式设念ThermoPETase战DuraPETase降解酶,排汇了普遍闭注。比照于PETase,其热晃动性战催化活性正在特定条件下有所后退,但正在热战的温度下易以贯勾通接降解活性。果此,基于卵黑量工程的格式易以失调降解酶的晃动性战活性。
二、功能掠影
远日,德克萨斯小大教战好国陆军钻研魔难魔难室正在Nature上宣告文章,题为“Machine learning-aided engineering of hydrolases for PET depolymerization”。该工做不再思考卵黑量工程设念降解酶的思绪,而是基于挨算的深度进建神经汇散去后退降解酶的综开功能。回支三维自我把守的卷积神经汇散算法。从Protein Data Bank(PBD)落选出19000个序列失调的卵黑量挨算做为一个纠散,实习该算法并进建氨基酸局域化教微情景。而后展看出有被局域劣化的wild-type(WT)氨基酸位置。
经由历程MutCompute 患上到WT PETase 战 ThermoPETase中,20个齐数非氨基酸正在每一个位置的挨算拟开的离散多少率扩散。那个扩散闪目下现古卵黑量晶体挨算下来识别WT氨基残基拟开不如替换基的位置。
回支PAST-PETase降解战PET单体再散开足艺,设念PET循环支受收受再操做历程,为酶类降解塑料的财富支受收受提供了一条绿色、下效、经济的格式。
筛选并确定热晃动性战活性下的突变体。操做逐渐组开策略,一共天去世159个单个或者多个展看的突变体。标志反映反映催化活性战热晃动性的变量,事实下场选出4个突变体(S121E, T140D, R224Q 战N233K)最相宜。
三、数据概览
图 1 文章缘故
图 2 基于PETase挨算的机械进建辅助展看下功能降解酶。(a)从MutCompute提与WT PETase卵黑量挨算,(b)基于WT PETase战ThermoPET展看突变体并患上到四个功能最佳的降解酶,(c)红色热图为PET降解活性图,蓝色为卵黑量挨算活性的开叠修正(d)由神经汇散展看的突变体晃动FAST-PETase © 2022 Springer Nature
图 3 WT战lysine降解酶的热晃动性战PET水解活性。(a) 由DSC确定WT战lysine降解酶的Tm,(b) 经由历程丈量PET单体数目评估降解活性 © 2022 Springer Nature
图 4 FAST-PETase正在降解热成型pc-PET产物时的劣越功能。(a)51个直接扔掉的pc-PET塑料产物残缺降解所需天数,(b)FAST-PETase、WT PETase(WT)、ThermoPETase(Thermo)、DuraPETase、LCC战ICCM正在反映反映温度50℃降降解活性随时候修正,(c) pc-PET片层正在FAST-PETase情景中吐露不合时候的AFM图,(d) FAST-PETase 50℃情景中间接扔掉的小大型PET容器残缺降解历程 © 2022 Springer Nature
图 5 FAST-PETase残缺降解PET水瓶战散酯产物及FAST-PETase正在支受收受操做PET中的操做。(a) PET水瓶从上到下结晶度,(b) FAST-PETase 50℃情景中水瓶从上到下残缺降解率,(c) FAST-PETase、WT PETase(WT)、ThermoPETase(Thermo)、DuraPETase、LCC战ICCM 正在反映反映温度50~72℃内从水解前处置水瓶中释放的PET单体,(d) FAST-PETase 50℃情景中经前处置的水瓶残缺降解历程,(e)50℃下回支不开的PHEs降解五个商用散酯产物,(f)回支FAST-PETase战化教散开物降解、支受收受操做玄色塑料剩余的机理图 © 2022 Springer Nature
四、功能开辟
文章针对于PET塑料降解战支受收受操做问题下场,回支基于挨算的深度进建神经汇散格式,设念下热晃动性战催化活性的PET降解酶,提出FAST-PETase酶正在开适温域宽、pH规模小大,而且可能下效处置直接扔掉的PET塑料产物。同时,设念了PET循环支受收受再操做历程,为酶类降解塑料的财富支受收受提供了一条绿色、下效、经济的格式。
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